Come vengono identificate le targhe nei campioni istologici?

Ehilà! Come fornitore di targhe, sono stato nel bel mezzo di tutte le cose legate alle placche. Una domanda che si presenta spesso è come le placche sono identificate nei campioni istologici. Ci immergemoci direttamente!

Cosa sono le targhe nei campioni istologici?

Prima di tutto, nel contesto di campioni istologici, le placche di solito si riferiscono a depositi anormali o aggregazioni all'interno dei tessuti. Questi possono essere costituiti da varie sostanze come proteine, lipidi o minerali. Ad esempio, nello studio delle malattie neurodegenerative come l'Alzheimer, le placche amiloide sono una caratteristica ben nota. Queste placche sono composte da aggregati di proteine ​​beta amiloide che si accumulano tra cellule nervose nel cervello.

Identificare le targhe: le basi

Quando si tratta di identificare le placche nei campioni istologici, il processo inizia in genere con la preparazione del campione. Il tessuto viene prima fisso per preservare la sua struttura. Questo viene spesso fatto usando sostanze chimiche come la formaldeide. Dopo la fissazione, il tessuto viene disidratato attraverso una serie di bagni di alcol. Quindi, è incorporato in un mezzo come la cera di paraffina per renderlo abbastanza fermo per tagliare sezioni sottili.

Una volta tagliate le sezioni, vengono posizionate su vetrini e colorate. La colorazione è un passo cruciale in quanto aiuta a evidenziare diversi componenti del tessuto, comprese le placche. Sono disponibili diverse tecniche di colorazione, ognuna con i suoi vantaggi.

Tecniche di colorazione per l'identificazione della placca

Colorazione ematossilina ed eosina (H&E)

La colorazione H&E è uno dei metodi di colorazione più comunemente usati in istologia. L'ematossilina colora i nuclei delle cellule blu - viola, mentre l'eosina colora il citoplasma e la matrice extracellulare rosa. Nel caso delle placche, possono apparire come aree distinte con diverse caratteristiche di colorazione rispetto al tessuto circostante. Ad esempio, le placche amiloide possono mostrare una trama più chiara o diversa nella sezione colorata H&E, che può dare il primo accenno alla loro presenza.

Macchie speciali per placche specifiche

• Macchia rossa del Congo: Questa macchia è particolarmente utile per identificare le placche amiloidi. Quando è presente l'amiloide, si lega al congo rosso e sotto la luce polarizzata, le placche mostrano una caratteristica birifrangenza verde mela. Questo è un modo molto specifico e affidabile per confermare la presenza di amiloide in un campione istologico.
• Macchie d'argento: Le macchie d'argento possono essere utilizzate per evidenziare alcuni tipi di placche, in particolare quelle contenenti proteine ​​o altre sostanze che hanno un'affinità per l'argento. Ad esempio, nello studio di alcuni disturbi neurologici, le macchie d'argento possono aiutare a visualizzare i grovigli neurofibrillari e alcuni tipi di placche associate al malfistriatura delle proteine.

Esame microscopico

Dopo la colorazione, le vetrini vengono esaminate al microscopio. Un patologo o un ricercatore cercherà caratteristiche morfologiche specifiche delle targhe. Ciò include le loro dimensioni, forma, posizione all'interno del tessuto e distribuzione. Ad esempio, nella malattia di Alzheimer, le placche amiloidi si trovano spesso nella corteccia cerebrale e nell'ippocampo e possono variare di dimensioni da piccole placche diffuse a piastre centrali grandi e dense.

Anche l'uso di diversi ingrandimenti è importante. L'ingrandimento a basso contenuto di potenza può fornire una panoramica del tessuto e aiutare a identificare le aree in cui è probabile che le targhe siano presenti. Un ingrandimento di potenza più elevato viene quindi utilizzato per esaminare la struttura dettagliata delle placche, come la disposizione delle sostanze aggregate al loro interno.

Immunoistochimica per l'identificazione della placca

L'immunohistochimica (IHC) è un altro potente strumento per l'identificazione della placca. Questa tecnica utilizza anticorpi che si legano specificamente a proteine ​​o altre molecole presenti nelle placche. Ad esempio, se vogliamo identificare placche amiloide - beta, possiamo usare anticorpi specifici della proteina beta amiloide.

Gli anticorpi sono etichettati con un marcatore, come un enzima o un colorante fluorescente. Quando gli anticorpi etichettati si legano alle proteine ​​bersaglio nelle placche, il marcatore può essere rilevato, mediante una reazione a colori (nel caso di un anticorpo marcato con enzimi) o mediante fluorescenza (nel caso di un anticorpo marcato fluorescente). Ciò consente un rilevamento molto specifico e sensibile delle placche nei campioni istologici.

Analisi dell'immagine digitale

Negli ultimi anni, l'analisi delle immagini digitali è diventata una parte importante dell'identificazione della placca nei campioni istologici. Con l'aiuto di software specializzato, possiamo analizzare le diapositive colorate in modo più obiettivo e quantitativo. Il software può misurare le dimensioni, il numero e la distribuzione delle placche, nonché la loro intensità di colorazione. Questi dati possono essere molto utili a fini di ricerca, come lo studio della progressione di una malattia o la valutazione dell'efficacia di un trattamento.

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Riferimenti

• Bancroft, JD e Gamble, M. (2008). Teoria e pratica delle tecniche istologiche. Churchill Livingstone.
• Kiernan, JA (2008). Metodi istologici e istochimici: teoria e pratica. Oxford University Press.
• Stites, DP, Terr, AI e Parslow, TG (1997). Immunologia di base e clinica. Appleton & Lange.